Tecnologia micorrízica na potencialização da atividade antioxidante de Anadenanthera colubrina para a produção in vitro de embriões bovinos

Descrição

A produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos é uma ferramenta que oferece benefícios na multiplicação de animais geneticamente superiores, otimizando a eficiência reprodutiva e contribuindo para o aprimoramento genético dos rebanhos. Contudo, o ambiente in vitro favorece a produção excessiva das espécies reativas de oxigênio (EROs), resultando no estresse oxidativo em oócitos, e comprometendo o desenvolvimento embrionário. Diferentes antioxidantes naturais são explorados para minimizar os efeitos do estresse oxidativo durante o cultivo in vitro. Nessa perspectiva, o uso da tecnologia de aplicação de fungos micorrízicos em plantas com atividade antioxidante poderia aumentar a produção de metabólitos secundários responsáveis por essa atividade, como observado em ensaios bioquímicos do extrato de Anadenanthera colubrina (EAcm). Portanto, o objetivo é avaliar o efeito do EAcm durante a maturação in vitro de oócitos bovinos. Para tanto, a proposta será conduzida em duas etapas. Inicialmente, visando estimar a capacidade antioxidante do EAcm em um modelo celular, fibroblastos bovinos serão cultivados na presença de 0, 10, 50, 100 e 200 µg/mL de EAcm e extrato de A. colubrina (EAc) e avaliados quanto à morfologia, viabilidade, metabolismo, níveis de apoptose e estresse oxidativo (primeira etapa, experimento único). Na segunda etapa, oócitos bovinos serão maturados de acordo com os grupos: (i) sem antioxidante (controle negativo), (ii) 100 µM de cisteamina (controle positivo), (iii) melhor concentração do EAcm e (iv) melhor concentração do EAc estabelecidas na primeira etapa. Em seguida, oócitos serão avaliados quanto à expansão e viabilidade das células do cumulus, maturação nuclear e citoplasmática (primeiro experimento) e estresse oxidativo (segundo experimento). Ainda, oócitos serão ativados artificialmente, cultivados e embriões serão avaliados quanto à cinética de desenvolvimento, qualidade embrionária e estresse oxidativo (terceiro experimento). Finalmente, espera-se com esta proposta a otimização da PIVE em bovinos a partir de um estudo integrado da medicina veterinária e da bioquímica vegetal.