ESTUDO DO EXTRATO, FRAÇÕES E FLAVONOIDES ISOLADOS DAS FLORES DE GYMNANTHEMUM AMYGDALINUM EM LINHAGEM DE GLIOBLASTOMA HUMANO U251.

Descrição

O glioblastoma (GB) configura-se como o tumor primário mais agressivo, letal e frequente no sistema nervoso central (SNC) em adultos. Suas características biológicas marcantes envolvem uma alta taxa de proliferação celular, acentuada heterogeneidade intratumoral, perfil invasivo infiltrativo no parênquima neural e uma expressiva resistência intrínseca ou adquirida aos protocolos quimioterápicos convencionais. Diante da baixa eficácia e dos severos efeitos adversos sistémicos que limitam a terapia clínica padrão baseada no protocolo Stupp, a prospecção científica voltada a novas biomoléculas de origem vegetal desponta como uma vertente estratégica crucial para o desenvolvimento farmacológico oncológico, visando a identificação de fitocompostos com múltiplos alvos terapêuticos. O presente estudo terá como escopo central caracterizar quimicamente e avaliar o potencial antitumoral in vitro promovido pelo extrato etanólico bruto (EEB), suas respectivas partições/frações e substâncias flavonídicas puras isoladas a partir das flores da espécie botânica Gymnanthemum amygdalinum (Asteraceae), uma matriz vegetal ainda inexplorada em comparação às suas folhas. Os ensaios biológicos serão conduzidos utilizando como modelo experimental a linhagem celular de glioblastoma humano U251. O efeito citotóxico e a interferência na viabilidade celular serão quantificados pelo método colorimétrico do MTT [brometo de 3-(4,5-dimetil-tiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio] em seis concentrações preestabelecidas ($3,12$ a $100\ \mu\text{g/mL}$ para extratos/frações e $3,12$ a $100\ \mu\text{M}$ para substâncias puras), determinando-se os valores de Concentração Inibitória Mínima de 50% ($CI_{50}$) e Efeito Máximo ($E_{\text{max}}$).Para a determinação do perfil de biossegurança e do Índice de Seletividade (IS), avaliar-se-á paralelamente a citotoxicidade em células normais não-tumorais, utilizando células mononucleares do sangue periférico humano (PBMC) obtidas de doadores saudáveis, tendo o quimioterápico padrão agente alquilante temozolomida (TMZ) como controle comparativo de atividade. Ensaios de migração celular por fechamento de ferida (scratch assay) serão realizados para avaliar a capacidade das amostras em conter a dispersão e a agressividade invasiva bidimensional do tumor. Adicionalmente, análises por microscopia óptica documental investigarão o potencial antimigratório e as alterações morfológicas e estruturais sofridas pela linhagem tumoral U251 sob tratamento. Os dados experimentais serão submetidos a análises estatísticas rigorosas (ANOVA one-way seguida pelo pós-teste de Tukey), garantindo a reprodutibilidade dos achados.