POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO DE MICRORGANISMOS ASSOCIADOS A “Rhynchophorus palmarum”: RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA E PRODUÇÃO DE COMPOSTOS BIOATIVOS

Descrição

A resistência aos antimicrobianos representa um dos principais desafios atuais para a saúde pública e a agricultura, sendo agravada pela disseminação de microrganismos resistentes e pela formação de biofilmes microbianos, que dificultam o tratamento de infecções e reduzem a eficácia dos antimicrobianos convencionais. Nesse contexto, cresce o interesse pela busca de microrganismos capazes de produzir compostos bioativos com potencial aplicação em saúde humana e no controle de patógenos agrícolas. Os insetos têm se destacado como importantes reservatórios de microrganismos com potencial biotecnológico, uma vez que sua microbiota intestinal abriga bactérias e fungos capazes de produzir metabólitos secundários com diferentes propriedades biológicas. Além disso, esses microrganismos podem atuar como reservatórios ambientais de genes de resistência antimicrobiana dentro da abordagem de Saúde Única (One Health). Rhynchophorus palmarum, importante praga agrícola associada a cultivos de palmeiras, apresenta uma microbiota intestinal ainda pouco explorada quanto ao seu potencial biotecnológico. Assim, este projeto tem como objetivo investigar microrganismos associados ao trato intestinal de R. palmarum, visando avaliar a produção de metabólitos bioativos com atividade antimicrobiana e antibiofilme, bem como investigar a ocorrência de genes de resistência antimicrobiana em isolados bacterianos. Para isso, adultos e larvas de R. palmarum serão coletados em áreas de cultivo de palmeiras e submetidos à dissecação asséptica para obtenção dos intestinos. Os intestinos serão processados microbiologicamente para o isolamento de bactérias, leveduras e fungos filamentosos, utilizando diferentes meios de cultura. Os microrganismos obtidos serão caracterizados por análises morfológicas, microscópicas e por espectrometria de massas MALDI-TOF MS. Quando necessário, será realizada identificação molecular baseada no sequenciamento do gene 16S rRNA para bactérias e da região ITS para fungos. Posteriormente, os microrganismos selecionados serão cultivados em meio líquido para obtenção de sobrenadantes e extratos brutos, que serão avaliados quanto à atividade antimicrobiana por difusão em ágar e microdiluição em caldo para determinação da concentração inibitória mínima (CIM). A atividade antibiofilme será investigada em microplacas de 96 poços utilizando o método de cristal violeta. Paralelamente, isolados bacterianos serão submetidos à investigação molecular de genes associados à resistência antimicrobiana por PCR. Os extratos que apresentarem atividade biológica serão submetidos à caracterização química preliminar por cromatografia em camada delgada (CCD), além de análises por GC/MS e HPLC/MS para identificação dos compostos bioativos. Espera-se ampliar o conhecimento sobre a microbiota intestinal de R. palmarum e identificar microrganismos capazes de produzir metabólitos com potencial aplicação antimicrobiana e antibiofilme, contribuindo para a prospecção de novas moléculas bioativas e para a compreensão da ocorrência de genes de resistência antimicrobiana em microrganismos associados a insetos.