Padronização e comparação de métodos de isolamento de DNA genômico em caprinos para aplicações biotecnológicas.

Descrição

A obtenção de material genético de alta qualidade e em quantidade adequada é o requisito fundamental para o sucesso das análises de genética molecular. Amostras de DNA genômico provenientes de animais de interesse zootécnico, especialmente caprinos, apresentam ampla aplicabilidade, abrangendo desde o diagnóstico clínico de doenças e testes de paternidade para registro genealógico até a seleção assistida por marcadores e estimativas de valor genético. Com o advento das biotecnologias moleculares, tais amostras tornaram-se essenciais também para estudos de polimorfismo e análises epigenéticas. Considerando que a eficiência da extração pode variar conforme a espécie e o método utilizado, este trabalho objetiva comparar a integridade, o rendimento e a viabilidade econômica da extração de DNA a partir de sangue caprino. Serão testados os protocolos de fenol-clorofórmio em sangue fresco (via isolamento de leucócitos), sangue congelado e adaptado para papel de filtro (FTA Card), além da utilização do kit comercial DNeasy® Blood & Tissue (QIAGEN). A avaliação da qualidade do DNA genômico extraído será realizada em duas etapas: a verificação da integridade por meio de eletroforese em gel de agarose a 1% e a análise por espectrofotometria no equipamento NanoDrop®, onde serão verificadas as razões de absorbância e a concentração (rendimento) das amostras. A definição do método com melhor custo-benefício e eficiência técnica é estratégica para otimizar a rotina laboratorial e subsidiar futuros estudos genômicos na caprinocultura. Para a execução desta proposta serão utilizados a infraestrutura, reagentes e materiais disponíveis no laboratório de Genética Animal do Departamento de Genética / UFRRJ.