AVALIAÇÃO ANALGESICA/NEUROMODULADORA DA FORMULAÇÃO LIDOCAINA+ CAPSAICINA NA NEUROPATIA DIABETICA

Descrição

O receptor de potencial transitório vanilóide tipo 1 (TRPV1) está envolvido na nocicepção, na sensação térmica e na modulação da dor periférica, sendo um dos principais alvos moleculares da capsaicina. A capsaicina, agonista seletivo do TRPV1, promove ativação inicial das fibras nociceptivas Aδ e C, seguida de dessensibilização funcional reversível associada à depleção de neuropeptídeos, como a substância P. Essa propriedade fundamenta seu uso tópico em condições dolorosas, incluindo neuropatia diabética. Entretanto, formulações comerciais podem induzir reações cutâneas locais que reduzem a adesão terapêutica. A neuropatia diabética periférica apresenta fase inicial de hiperalgesia térmica e mecânica, evoluindo para degeneração de fibras sensoriais e hipoalgesia. Assim, estratégias que associem analgesia sintomática e potencial efeito neuromodulador são de grande interesse. Este estudo tem como objetivo avaliar o efeito analgésico e neuromodulador de uma formulação tópica em gel creme contendo lidocaína (liberação imediata), e lidocaína/capsaicina (liberação controlada) em modelo experimental de neuropatia diabética induzida por Streptozotocin em camundongos Swiss machos. Serão utilizados 90 animais, distribuídos em oito grupos experimentais. Os animais serão divididos em dois grandes grupos: saudáveis (n=30) e diabéticos (n=60). Os animais saudáveis serão subdivididos em: (1) Sem tratamento (n=10); (2) Veículo (n=10); (3) Lidocaína + capsaicina (n=10); No 7 dia pós-indução do diabetes pelo STZ, os animais diabéticos serão subdivididos nos mesmos quatro grupos (n=20 cada): (5) Diabético sem tratamento; (n=20) (6) Diabético + veículo; (n=20) (7) Diabético + lidocaína + capsaicina; (n=20) O tratamento tópico será realizado duas vezes ao dia durante 15 dias, incluindo animais que evoluírem para hiperalgesia/normoalgesia/hipoalgesia, com o objetivo de avaliar possível efeito neuromodificador da formulação na neuropatia. A avaliação comportamental/biopsias ( imunohistoquimica) das patas será realizada no baseline antes da indução do diabetes por meio dos testes de Von Frey (sensibilidade mecânica), analgesímetro plantar de Hargreaves (sensibilidade térmica) e e tail flick ( sensibilidade térmica na cauda). Após indução do diabetes e confirmação da glicemia serão realiados novo teste de comportamento. Ao final do protocolo de uso tópico (15 dias, 2x ao dia) no dia 21 será realizada novo teste de comportamento e na sequencia eutanásia dos animais para análise imunohistoquímica da densidade de fibras nervosas intraepidérmicas por marcação de PGP9.5 e avaliação de regeneração axonal por expressão de GAP-43. Fragmentos das patas serão utilizadas para expressão gênica quantitativa do seguinte painel: ATF3; SARM1; PGC-1α; NRF2; GAP-43; STAT3; BDNF TRPV1. Todos os dados comportamentais, histopatológicos e qRT PCR serão analisados por meio de testes não paramétricos. Comparações entre múltiplos grupos independentes serão realizadas utilizando o teste de Kruskal-Wallis, seguido pelo pós-teste de Dunn para múltiplas comparações, com o nível de significância estabelecido em p < 0,05. Comparações pareadas (p. ex. pré- vs. pós-tratamento nos mesmos animais) serão analisadas pelo teste de postos sinalizados de Wilcoxon. As análises serão conduzidas utilizando o software GraphPad Prism® (versão 5).