Espectroscopia ATR-FTIR como ferramenta para identificação do Trypanosoma cruzi em Triatoma brasiliensis (Hemiptera: Reduviidae, Triatominae)

Descrição

A infestação e colonização por triatomíneos em ambientes antrópicos rurais e urbanos continuam sendo um sério problema no controle da infecção pelo Trypanosoma cruzi para humanos e animais. Recentemente nosso grupo descreveu que a utilização da bioespectroscopia com o infravermelho médio (ATR-FTIR) apresentou excelente desempenho para discriminar os triatomíneos não infectados e infectados com o T. cruzi. Além disso, a técnica distinguiu as DTUs utilizadas nos insetos experimentalmente infectados. Deste modo nosso objetivo neste momento será avaliar a bioespectroscopia com o ATR-FTIR para identificação da infecção natural e as diferentes DTUs do T. cruzi em Triatoma brasiliensis e outros triatomíneos capturados no semiárido do Rio Grande do Norte. Para isto capturas de triatomíneos em municípios da microrregião da Borborema potiguar serão utilizados para coleta de espectros de infravermelho do abdomem e da ampola retal de cada inseto. Após a captura dos espectros, o conteúdo intestinal do inseto será coletado e utilizado observação de parasitos por exame direto e, isolamento por xenocultura. Em seguida, a identificação dos parasitos será por análise da PCR do kDNA e caracterização molecular com diferentes marcadores para identificação das DTUs. Os isolados do T. cruzi serão genotipados com os marcadores de DNA genômico como a amplificação do gene 24Sα do DNA ribossomal, análise do polimorfismo do gene mitocondrial da subunidade 2 do citocromo oxidase e espaçador intergênico dos genes miniexon. Os resultados de identificação de insetos infectados devem ser realizados com rapidez e eficiência além de conhecer a diversidade genética dos parasitos envolvidos nos ambientes antrópicos para compreender a dispersão do parasito na área. Desta forma, a bioespectroscopia aplicada com a utilização do ATR-FTIR poderá ser utilizada como ferramenta de diagnóstico, auxiliando na vigilância entomológica da infecção por este parasito