Hemotoxicidade da peçonha da serpente Bothrops erythromelas: investigação in vitro de mecanismos celulares, inflamatórios e hemostáticos

Descrição

O ofidismo representa importante problema de saúde pública, especialmente em regiões tropicais e subtropicais, sendo reconhecido como doença tropical negligenciada devido à elevada morbimortalidade, ao impacto socioeconômico e às limitações de acesso e efetividade da soroterapia. No Nordeste brasileiro, Bothrops erythromelas, conhecida como jararaca-da-seca ou jararaca-do-sertão, apresenta grande importância médica e epidemiológica. Apesar disso, permanece menos estudada que outras espécies botrópicas e não compõe a mistura antigênica utilizada na produção dos soros antibotrópicos brasileiros, reforçando a necessidade de estudos sobre sua fisiopatologia e sobre alvos terapêuticos complementares. As peçonhas botrópicas são misturas complexas de toxinas capazes de interferir no sangue, na hemostasia e na resposta inflamatória. Entretanto, ainda são pouco compreendidos os mecanismos pelos quais a peçonha de B. erythromelas interage com células sanguíneas humanas e como essas alterações contribuem para distúrbios hemostáticos e inflamatórios. Embora muitos estudos sobre hemotoxicidade ofídica se concentrem no plasma, nos fatores de coagulação ou nas plaquetas, hemácias, leucócitos e sua interação com o sistema complemento permanecem componentes relevantes e subexplorados. Nesse contexto, o presente projeto tem como objetivo investigar, em modelo in vitro, a hemotoxicidade da peçonha de B. erythromelas sobre células sanguíneas humanas e suas repercussões hemostáticas e inflamatórias. Serão avaliados, de forma integrada, três eixos celulares principais (hemácias, leucócitos e plaquetas), suas interações recíprocas e seus efeitos sobre hemostasia, inflamação e complemento. Inicialmente, serão investigados os efeitos diretos da peçonha sobre cada população celular. No eixo eritrocitário, serão avaliados hemólise, morfologia, fragilidade osmótica e mecânica, permeabilidade de membrana, estresse oxidativo e marcadores compatíveis com eriptose. No eixo leucocitário, serão analisados viabilidade, ativação celular, produção de mediadores inflamatórios, estresse oxidativo e parâmetros funcionais da resposta inflamatória. No eixo plaquetário, serão avaliados agregação, adesão, integridade celular, liberação de mediadores solúveis e alterações associadas à hemostasia primária. Além da avaliação isolada, será investigado se células previamente expostas à peçonha, ou seus sobrenadantes, interferem em desfechos de outras populações celulares, como ativação plaquetária, dano eritrocitário, resposta leucocitária, produção de mediadores inflamatórios e formação de um microambiente pró-coagulante ou pró-inflamatório. Paralelamente, serão avaliadas repercussões sobre o eixo hemostático, incluindo coagulação plasmática e fibrinólise, a fim de verificar se alterações celulares induzidas pela peçonha contribuem para distúrbios hemostáticos além da ação direta sobre fatores plasmáticos. De forma complementar e transversal, será considerada a participação de componentes séricos termolábeis compatíveis com o sistema complemento, especialmente quando a interação entre células sanguíneas, soro e peçonha puder amplificar hemólise, ativação celular, inflamação ou alterações hemostáticas. Inibidores enzimáticos e moduladores farmacológicos serão utilizados para investigar a contribuição de classes específicas de toxinas e vias do hospedeiro envolvidas nesses processos. O delineamento considerará o sexo como variável biológica relevante, buscando incluir voluntários homens e mulheres de forma equilibrada, o que amplia a representatividade das amostras, evita a extrapolação acrítica de resultados obtidos em apenas um sexo e se alinha ao princípio da equidade de gênero na pesquisa biomédica. O projeto também se alinha aos princípios dos 3Rs da experimentação animal, especialmente à substituição, ao priorizar modelos in vitro baseados em sangue humano antes da proposição de estudos in vivo, permitindo refinar hipóteses, selecionar concentrações biologicamente relevantes, identificar desfechos prioritários e restringir experimentos animais futuros a perguntas mais específicas e justificadas. Com essa proposta, espera-se esclarecer mecanismos celulares e hemostáticos envolvidos na toxicidade sistêmica induzida pela peçonha de B. erythromelas, com atenção à integração entre dano celular, inflamação, complemento e hemostasia, o que poderá auxiliar na proposição de novos alvos terapêuticos e estratégias complementares à soroterapia, além de fortalecer a formação de recursos humanos em Hematologia e Toxinologia aplicadas.